กล้องจุลทรรศน์สไลด์ใช้เพื่อตรวจสอบสิ่งมีชีวิตเซลล์เดียวและเพื่อดูพืชและสิ่งมีชีวิตขนาดเล็กอย่างใกล้ชิด สไลด์ที่เตรียมไว้มีสองประเภท: ตัวยึดแบบแห้งและแบบเปียก วิธีการเตรียมแต่ละประเภทใช้สำหรับติดตั้งเซลล์ประเภทต่างๆ หากคุณกำลังติดตั้งชิ้นงานทดสอบสีซีดหรือโปร่งแสงโดยเฉพาะ คุณอาจต้องย้อมชิ้นงานทดสอบเพื่อให้มองเห็นได้ใต้กล้องจุลทรรศน์
ขั้นตอน
วิธีที่ 1 จาก 3: การเตรียมเมาท์แบบแห้ง
ขั้นตอนที่ 1 เลือกสไลด์ที่สะอาด
ถือสไลด์ขึ้นที่แหล่งกำเนิดแสงแล้วมองผ่านเพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีรอยเปื้อนและสิ่งสกปรก สไลด์ไมโครสโคปส่วนใหญ่จะแบนด้านบนและด้านล่างและมีรูปร่างเป็นสี่เหลี่ยม มีความชัดเจนช่วยให้แสงจากกล้องจุลทรรศน์ส่องผ่านและให้แสงสว่างแก่ชิ้นงานตัวอย่างโปร่งแสง หากสไลด์ของคุณสกปรกหรือมีรอยเปื้อน คุณจะไม่สามารถตรวจสอบชิ้นงานทดสอบของคุณได้อย่างมีประสิทธิภาพ
หากคุณพบว่าสไลด์ไมโครสโคปของคุณมีสิ่งเจือปนอยู่ รวมทั้งลายนิ้วมือของคุณเอง ให้ล้างมันอย่างรวดเร็วด้วยสบู่เหลวและน้ำ เช็ดสไลด์ให้แห้งโดยใช้ผ้าสะอาด อย่าใช้ทิชชู่หรือกระดาษทิชชู่ เพราะอาจทิ้งผ้าสำลีไว้ข้างหลัง
ขั้นตอนที่ 2 ตรวจสอบชิ้นงานทดสอบเพื่อดูว่าจำเป็นต้องหั่นหรือไม่
ตัวอย่างชิ้นงานต้องโปร่งแสง (หรือกึ่งโปร่งแสง) ถึงโปร่งแสงเพื่อให้แสงผ่านได้ หากแสงไม่สามารถส่องผ่านชิ้นงานทดสอบและเข้าไปในช่องมองภาพของกล้องจุลทรรศน์ได้เต็มที่ คุณจะไม่สามารถมองเห็นชิ้นงานทดสอบผ่านกล้องจุลทรรศน์ได้
ตัวอย่างบางส่วน (เช่น เส้นผมหรือปีกแมลง) มีลักษณะบางและโปร่งแสงในตัวเอง และไม่จำเป็นต้องหั่นด้วยใบมีดโกน
ขั้นตอนที่ 3 หั่นชิ้นตัวอย่างบาง ๆ ออก
ใช้ใบมีดโกนตัดวัสดุตัวอย่างของคุณให้เป็นชิ้นบางและโปร่งแสง เมาท์แบบแห้งเป็นวิธีการเตรียมที่ง่ายที่สุด เนื่องจากไม่ใช้ของเหลวใดๆ ระหว่างสไลด์กับชิ้นงานทดสอบ แท่นยึดแบบแห้งเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการตรวจสอบตัวอย่างที่ไม่มีความเสี่ยงต่อการทำให้แห้ง วัสดุที่มักติดตั้งแบบแห้ง ได้แก่:
- ไม้ก๊อกหรือไม้บัลซ่า
- กลีบดอกหรือใบ.
- ขาหรือปีกของแมลง
- ผม ขน หรือขนนก
ขั้นตอนที่ 4 วางตัวอย่างตัวอย่างบนสไลด์
ใช้คีมจับชิ้นตัวอย่างบางๆ ของคุณ วางบนด้านหนึ่งของสไลด์อย่างประณีต หากคุณกำลังใช้สไลด์เว้า (โดยที่ด้านหนึ่งจุ่มลง) ให้วางชิ้นงานทดสอบไว้ตรงกลางของพื้นที่เว้า
- ติดตั้งชิ้นงานทดสอบบนสไลด์เว้า หากคุณกังวลว่าชิ้นงานทดสอบจะม้วนหรือเลื่อนออกจากแผ่นเรียบ ตัวอย่างเช่น ใช้สไลด์เว้า หากคุณกำลังเตรียมกลีบดอกไม้ที่ม้วนงอไปด้านใดด้านหนึ่ง
- สำหรับชิ้นงานทดสอบประเภทอื่นๆ ทั้งหมด สไลด์แบบเรียบจะทำงานได้ดี
ขั้นตอนที่ 5. วางใบปะหน้าไว้เหนือชิ้นงานตัวอย่าง
ใบปะหน้าจะป้องกันไม่ให้ตัวอย่างตัวอย่างหลุดออกจากสไลด์ แผ่นกันลื่นจะป้องกันตัวอย่างตัวอย่างในกรณีที่ผู้ใช้กล้องจุลทรรศน์คนใดคนหนึ่งบังเอิญลดเลนส์ลงมากจนกระทบกับชิ้นงานทดสอบ
- แผ่นปิดเป็นชิ้นแก้วใสบางมากหรือพลาสติกทั่วไป สลิปแต่ละอันเป็นเรื่องเกี่ยวกับ 3⁄4 นิ้ว (1.9 ซม.) ทั้งความกว้างและความยาว
- สไลด์ที่เตรียมไว้ของคุณพร้อมสำหรับการตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์แล้ว
วิธีที่ 2 จาก 3: การเตรียมภูเขาเปียก
ขั้นตอนที่ 1. วางน้ำ 1 หยดลงบนสไลด์ของคุณ
ใช้ eyedropper หยดน้ำ 1 หยดลงบนกึ่งกลางของสไลด์แบนหรือเว้า หยดน้ำนี้เป็นชื่อเรียกของภูเขาที่เปียก ของเหลวช่วยให้ตัวอย่างตัวอย่างชื้นและป้องกันไม่ให้ตัวอย่างอินทรีย์เปียกและแห้งและบิดเบี้ยวรูปร่าง น้ำยังเก็บรักษาตัวอย่างสิ่งมีชีวิต เช่น สิ่งมีชีวิตเซลล์เดียว
หากคุณต้องการทำสไลด์แบบถาวรโดยใช้วัสดุอินทรีย์ที่ตายแล้ว คุณสามารถใช้ยาทาเล็บแบบใสบางๆ แทนการใช้หยดน้ำได้
ขั้นตอนที่ 2 ขูดหรือหั่นส่วนของตัวอย่างเปียก
ชิ้นงานตัวอย่างที่ใช้สำหรับแท่นยึดแบบเปียกมักเป็นวัสดุอินทรีย์แบบเปียกหรือแบบมีชีวิต ใช้ใบมีดโกนหรือไม้จิ้มฟันตัดหรือขูดชิ้นงานเปียกเล็กน้อย วัสดุที่ใช้กันทั่วไปในการทำรางสไลด์แบบเปียก ได้แก่:
- เซลล์แก้มหรือแผ่นฟัน (ใช้ไม้จิ้มฟันขูดออกจากปาก)
- ส่วนตัดขวางของลำต้นพืชแบบบาง (ตัดด้วยใบมีดโกน)
- หากคุณกำลังศึกษาสิ่งมีชีวิตเซลล์เดียว เช่น อะมีบาหรือแหนบพารามีเซียมจะมีประโยชน์เพียงเล็กน้อย ให้ใช้หลอดหยดที่สะอาดเพื่อหยิบน้ำสองสามหยดที่สิ่งมีชีวิตเซลล์เดียวหรือสาหร่ายกำลังว่ายน้ำ
ขั้นตอนที่ 3 วางตัวอย่างของคุณลงในหยดน้ำ
ขึ้นอยู่กับประเภทของวัสดุที่คุณใช้เป็นตัวอย่างของคุณ ใช้คีม แหนบ หรือไม้จิ้มฟันเพื่อย้ายตัวอย่างของคุณไปยังสไลด์ วางชิ้นงานทดสอบไว้ที่กึ่งกลางของหยดน้ำเพื่อให้แขวนอยู่ในของเหลว
หากคุณกำลังใช้ eyedropper หยิบสิ่งมีชีวิตเซลล์เดียว ให้หยดน้ำ 1 หรือ 2 หยดลงบนสไลด์แล้ว
ขั้นตอนที่ 4. วางใบปะหน้าไว้ด้านบนของชิ้นงานทดสอบที่เปียก
ถือใบปิดที่มุม 45 องศา วางขอบด้านหนึ่งลงด้านขวาถัดจากชิ้นงานทดสอบบนหยดน้ำ จากนั้นลดอีกด้านหนึ่งของสไลด์ลงจนแบนราบบนชิ้นงานทดสอบ คุณควรเห็นหยดน้ำกระจายอยู่ใต้ใบครอบจนสุดขอบ
อย่าแตะหรือกดบนใบปิดเมื่อเข้าที่ หากคุณทำเช่นนั้น คุณอาจเสี่ยงที่จะบีบตัวอย่างตัวอย่างและน้ำออกจากสไลด์
วิธีที่ 3 จาก 3: การย้อมสีตัวอย่างเซลลูล่าร์
ขั้นตอนที่ 1. วางกระดาษทิชชู่ไว้กับขอบด้านหนึ่งของใบปะหน้า
วางผ้าเช็ดตัวไว้กับขอบใบโดยไม่รบกวนวัสดุใต้ใบปะหน้า กระดาษทิชชู่แบบดูดซับจะดึงน้ำบางส่วนออกจากใต้ใบปิด และดึงสารย้อมสีใต้ใบปิดฝาลงบนชิ้นงานทดสอบ
- หากตัวอย่างสไลด์ที่ติดตั้งแบบเปียกของคุณมีสีซีดหรือไม่มีสี (เช่น ส่วนตัดขวางของก้านพืชที่ไม่มีสี) อาจมองเห็นได้ยากเมื่อมองผ่านกล้องจุลทรรศน์ การย้อมสีชิ้นงานจะช่วยให้คุณเห็นรูปร่างและเนื้อสัมผัสได้ดีขึ้น
- โดยปกติจะทำหลังจากที่คุณได้ตรวจสอบชิ้นงานทดสอบที่เปียกในสไลด์แล้วโดยไม่ทำให้เปื้อน อาจเตรียมสไลด์ไว้แล้วแม้ว่าจะไม่ได้เปื้อนก็ตาม
ขั้นตอนที่ 2 วางไอโอดีนหรือเมทิลีนบลู 1 หยดลงบนอีกด้านหนึ่งของใบปิด
ใช้หลอดหยดตาแล้วหยดสารเคมีที่เปื้อนบนสไลด์ไมโครสโคป ถัดจากสลิปฝาครอบ ระวังให้จ่ายแค่ 1 หยด สารย้อมสีส่วนเกินอาจไหลออกจากสไลด์
- สามารถซื้อไอโอดีนหรือเมทิลีนบลูได้ที่ร้านขายอุปกรณ์การศึกษาหรือร้านขายอุปกรณ์ชีววิทยา
- อีกวิธีหนึ่งในการทำเช่นนี้คือการเพิ่มหยดของสารย้อมสีลงในน้ำบนสไลด์เปียกเมื่อคุณเตรียมมันในครั้งแรก ในกรณีนี้คุณไม่จำเป็นต้องใช้กระดาษชำระ
ขั้นตอนที่ 3 รอในขณะที่สารย้อมสีถูกวาดไว้ใต้ฝาสไลด์
น้ำยาขจัดคราบจะเริ่มซึมเข้าไปใต้ใบปะหน้าขณะที่กระดาษทิชชู่ดึงน้ำออกจากอีกด้านหนึ่ง อาจใช้เวลานานถึง 5 นาทีกว่าที่ไอโอดีนหรือเมทิลีนบลูจะจมอยู่ใต้ฝาปิดสไลด์และทำให้ตัวอย่างอิ่มตัว
เมื่อไอโอดีนหรือเมทิลีนบลูลากไปจนสุดใต้ฝาสไลด์แล้ว ชิ้นงานจะถูกย้อมจนหมด
ขั้นตอนที่ 4. เช็ดคราบส่วนเกินออกด้วยกระดาษชำระที่สะอาด
ทำความสะอาดพื้นผิวของสไลด์เพื่อไม่ให้ของเหลวที่หลุดออกจากด้านข้าง สไลด์ที่ติดตั้งแบบเปียกของคุณตอนนี้เปื้อนแล้วและพร้อมที่จะสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์